论文沙门氏菌检测能力验证结果分析，本文是关于沙门氏菌相关论文参考文献范文与沙门氏菌和检测和验证方面毕业论文的格式范文.
摘 要：本实验室参加了NIFDC-PT-135 巧克力中沙门氏菌检验能力验证,检验方法如下,按照作业指导书要求及GB4789.4-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》中的方法,将3 份巧克力样品进行沙门氏菌的分离、生化实验和血清分型.运用全自动荧光免疫分析系统进行初步筛查,全自动微生物生化鉴定系统对疑似菌株进行鉴定.结果显示,编号CODE0375 检出肠道沙门菌双相亚利桑那亚种,编号CODE0770、CODE0766 均检出鼠伤寒沙门氏菌.本实验顺利完成,与考核方结果一致,获得满意结果.最后得出结论,参加能力验证能够提高检验机构的检验水平,亦可增加检验机构检验结果的可靠性,是检验机构内部质量控制的有效方式.
关键词：沙门氏菌；能力验证；检验方法
Abstract：This laboratory participated in the verification of Salmonella detection capability in NIFDCPT-135 chocolate.The method is as follows,biochemical experiment and blood purification of three chocolatesamples were conducted in accordance with the requirements of work instructions and the methods ofGB4789.4-2016 national standard of food microbiology test for Salmonella bacteria.In addition, automaticfluorescence immunoassay system was used for screening and automatic microbial biochemical identificationsystem was used to identify suspected bacteria.Resultsis that,No.CODE0375 detected intestinal Salmonellabiphasic Arizona subspecies, No.CODE0770 and No. 0766 detected Salmonella typhoid.The experiment wassuccesully completed, which was consistent with the result of the appraisal party and satiactory resultwas obtained.The ability to participate in the verification can improve the inspection level of the inspectioninstitution, and also increase the reliability of the inspection result of the inspection institution.
Key words：Salmonella; Ability of verification; Detection method
中图分类号：TS207.4
沙门氏菌广泛存在于自然界中,是一种常见的食源性致病菌,为革兰氏阴性杆菌,无荚膜和芽孢,属于肠杆菌科[1].在中国,每年由沙门氏菌引起的食物中毒占所有细菌性食物中毒事件的70% ～ 80%,由于沙门氏菌菌体溶解时,细胞壁能够释放出脂多糖,从而形成内毒素[2-3],如果食用了污染了沙门氏菌的食物,就容易引起食物中毒,细菌会从肠道侵入血液而遍布全身,引起某些神经症状以及肝、肾和心脏病变或至死亡[4-5].因此,在食品微生物检验检测工作中,对沙门氏菌的检测意义重大.
本实验室参加此次国家食品药品监督管理总局组织的能力考核,结合这几年微生物检验的经验,能够分析本次沙门氏菌能力验证试验中出现的问题,寻找出解决方案,为以后的检验检测工作提供必要的参考.
1 材料与方法
1.1 样品
3 份考核样品,编号为CODE0375、CODE0770、CODE0766,每份样品为一块瓶装巧克力,装量约为10g,采用玻璃瓶包装.
1.2 培养基及试剂
缓冲蛋白胨水（BPW）、四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液、亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液、亚硫酸铋（BS）琼脂、木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂、沙门氏菌显色培养基、三糖铁（TSI）琼脂、营养琼脂、Swarm 琼脂、半固体培养基、沙门氏菌生化鉴定试剂盒（广州环凯生物科技有限公司）、VIDAS 沙门氏菌（SLM）试剂条,VITEK2 革兰氏阴性细菌鉴定卡（法国梅里埃公司）、沙门氏菌阳性菌株鼠伤寒沙门氏菌（ATCC14028）以及沙门氏菌属诊断血清（宁波天润生物药业有限公司,丹麦SSI 公司）.
1.3 实验方法
按照考核方的作业指导书中的要求处理样品.样品处理好以后, 依据GB 4789.4-2016《食品全国家标准食品微生物学 沙门氏菌检验》[6] 进行实验,得到疑似纯菌落后进行血清分型.全自动荧光免疫分析系统（MINI VIDAS）和全自动微生物生化鉴定系统（VITEK2）作为实验辅助仪器进行筛选和鉴定,得出实验结果后报告.
1.3.1 样品的前处理
在生物安全柜内进行,需要准备90 mL预热至45 ℃的 BPW：首先将灭菌的BPW 加入检样瓶中,待巧克力融化后再加入无菌均质袋中.取20 mL 灭菌的BPW清洗检样瓶,将洗液加入均质袋内,再取20 mL 灭菌BPW 重复清洗一次,最后向均质袋内加入30 mL灭菌 BPW,充分均质混匀,制成1 ∶ 10 稀释液.依此方法,分别对3 件样品进行前处理.将编好号的BPW 增菌液、阳性对照、空白对照一同放入36 ℃培养箱中18 h.
1.3.2 增菌培养
在 10 mL TTB 和10 mL SC 内, 分别转接1 mLBPW 培养物,并分别放入（42&plun;1）℃培养箱和36 ℃培养箱中培养24 h.同时取0.5 mL 灭活的BPW 增菌液加入到沙门氏菌（SLM）试剂条中,按操作说明书进行操作.
1.3.3 选择性分离
将TTB、SC 增菌液接种到XLD 琼脂平板、BS 琼脂平板和沙门显色培养基上,放入36 ℃培养箱中,BS琼脂平板培养48 h,XLD 琼脂平板和沙门显色培养基培养24 h.培养结束后,观察平板上的菌落特征,判定有无可疑菌落生长.
1.3.4 生化鉴定实验
在每个平板上选取 3 个疑似菌落,接种于三糖铁（TSI）斜面上,同时接种到营养琼脂平板上进行纯化,36 ℃培养箱中培养24 h.将纯化后的菌落用沙门氏菌生化鉴定试剂盒和VITEK2 鉴定.
1.3.5 血清学鉴定
先检查培养物是否有会自凝,在玻片上滴一滴生理盐水,将菌落涂在水滴中,等待30 ～ 60 s 后,若出现菌体凝集,则有自凝性.没有自凝现象的菌落才做血清学鉴定.
（1）O 抗原鉴定.O 抗原可与相应抗体呈颗粒状反应.挑取一环待测菌涂在玻片的两个区域内,分别滴加A ～ F 多价O 血清和生理盐水各一滴,将混合液混匀等待1 min 后,观察是否有凝集现象.被多价O血清凝集后,按照沙门氏菌属诊断血清说明书中的要求依次凝集OMA、OMB、OMC、OMD,来判定O 群.
随后继续做H 抗原凝集实验.H 抗原与对应抗体凝集后呈絮状,大多数沙门氏菌的H 抗原有两相.如果遇到H 相不凝集时,应该先恢复动力.如果恢复动力后还不能凝集,则需诱导后再做.
（2）动力恢复试验.取疑似菌落,接种到半固体琼脂上,取菌落最边缘的部分进行凝集试验.
（3）平板诱导法.加入1 ～ 2 滴已凝集的诱导血清至Swarm 培养基中,混合均匀,将待凝集菌株接种到板,36 ℃培养箱中培养12 h.挑取菌落最边缘的部位进行H 相鉴定.
2 结果与分析
2.1 MINI VIDAS 全自动荧光免疫分析结果MINI VIDAS 的检测结果为阳性对照鼠伤寒沙门氏菌（ATCC14208）、CODE0375、CODE0770、CODE0766 均为沙门氏菌阳性（见表1）.
2.2 增菌后选择性分离的结果
增菌划线分离后,平板观察结果,编号为CODE0375、CODE0770、CODE0766 的培养基平板上均出现可疑菌落特征.各平板上菌落特征结果见表2.
2.3 生化实验和VITEK2 鉴定结果
将纯化后的菌落进行生化实验和VITEK2 鉴定,结果均与沙门氏菌属生化特性一致,详细结果见表3.
2.4 血清分型结果
参照GB 4789.4-2016 中血清学分型鉴定要求对CODE0375、CODE0770、CODE0766 三个样品进行血清分型,结果见表4.
3 结论与讨论
能力验证是保证实验室检测结果质量的一种必要手段.各个实验室参与能力验证,可了解承检实验室的检测能力,保证检测结果的准确性,从而提高各个实验室的检测水平,确保检测质量[7-8].各个实验室通过参加能力验证,可以发现自身在检验工作中存在的问题,并进行改进和纠正[9].
此次能力验证本实验室除了按照GB 4789.4-2016规定的方法鉴定以外,还运用了全自动荧光免疫分析结果（MINI VIDAS）作为辅助,对样品进行初筛.
MINI VIDAS 可以直接使用增菌液上机检测,避免人工检测过程中造成假阴性,可与传统方法相互补充,防止漏检[10].在本次实验中,为了保证实验结果的准确性,采用了国产宁波天润和丹麦SSI 公司两种品牌的血清相互验证[11].沙门显色培养基对沙门氏菌属有很高的特异性,对沙门菌种的分离和判定都有很大的帮助,对一些与沙门氏菌很相似的变形杆菌都能够很直观地区分开[12-13].
在整个实验的过程中,一定要注意对所有试剂进行验收,验收合格以后才能使用.按照GB4789.28-2013《食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》来进行验收[14].目前食品微生物的检验方法有传统检验方法,免疫学法和分子生物学检测法三种.这三种方法各有优点,在检验工作中可相互补充和辅佐,以提高检验的准确性.
参考文献：
[1] 颜 瑛,罗玉彬,王文娟,等. 食品能力验证中沙门氏菌的分离和鉴定[J]. 食品安全质量检测学报,2015,6（9）：6-9.
[2] 陈杖榴. 兽医药理学[M].2 版. 北京：中国农业出版社,2001.
[3] 陈 玲,张菊梅,杨小鹃,等. 南方食品中沙门氏菌污染调查及分型[J]. 微生物学报,2013,12（53）：1326-1334.
[4] 孙 晶,王歆睿,魏静元,等. 食品中金葡萄球菌和沙门氏菌检出能力验证结果与分析[J]. 食品安全质量检测学报,2017,8（9）：3561-3564.
[5] 史怀平,杨增岐,张淑霞,等. 猪亚利桑那菌的初步分离与鉴定[J]. 西北农林科技大学学报（自然科学版）,2004（10）：11-73．
[6] 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.GB4789.4-2016 食品安全国家标准 食品微生物学 沙门氏菌检验[S]. 北京：中国标准出版社,2016.
[7] 中华人民共和国卫生部卫生监督中心. 卫生检测实验室认证认可实施 指南[S]. 北京：中国标准出版社,2008.
[8] 吉彦莉,郭勇峰,王敬辉,等. 食品微生物学检测能力验证分析[J]. 公共卫生与预防医学,2015,26（3）：110-112.
[9] 贾 东,李 宏,王金玲,等. 食品微生物学能力验证过程质量控制的研究[J]. 现代测量与实验室管理,2012（6）：49-52.
[10] 高 晗,何 娟,严 礼.3 种沙门氏菌检测方法能力验证[J]. 食品安全质量检测学报,2017,8（2）：513-514.
[11] 李志勇,谢钧宪,许龙岩,等. 食品微生物检验的质量控制[J]. 检验检疫科学,2004,14（4）：5-9.
[12] 鞠慧萍,孙鹏翔,苏粉良,等. 食品能力验证样品中沙门氏菌的分离及鉴定[J]. 农产品加工（学刊）,2014（15）：48-49.
[13] 陈茂义,胡 婕,刘建昭,等. 科马嘉显色培养基和XLD、SS、HE 分离食品中沙门氏菌效果比较[J].公共卫生与预防医学,2008（4）：12-14.
[14] 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.GB4789.28-2013 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求[S]. 北京：中国标准出版社,2013.
上文总结:此文是关于经典沙门氏菌专业范文可作为沙门氏菌和检测和验证方面的大学硕士与本科毕业论文沙门氏菌论文开题报告范文和职称论文论文写作参考文献.
参考文献：
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