论文SDHB对结直肠癌化疗敏感性的影响，该文是直肠癌类专科毕业论文范文和结直肠癌和敏感性和化疗相关毕业论文的格式范文.
摘 要：目的 探讨SDHB 基因的表达对结直肠癌化疗敏感性的影响.方法 实验组（SW620、HCT-116、LOVO 三株结肠癌细胞）、对照组（正常肠上皮细胞IEC-6 细胞）,术前化疗组（术前接受结直肠癌接受新辅助化疗）、术前无化疗组,化疗敏感组、化疗不敏感组.运用RT-PCR、MTS 和流式细胞术检测转然后癌细胞中的SDHB 基因的表达.结果 与对照组相比,实验组SDHB mRNA 在各结肠癌细胞株中表达降低,SDHB 表达下调水平在LOVO 细胞中尤为显著（P等于0.001）.术前接受直肠癌新辅助化疗组的SDHB mRNA 相对表达量明显高于术前无化疗组（P等于0.002）.SDHB mRNA 在化疗敏感组的表达值显著高于不敏感组中表达相对值（P等于0.02）.结论 SDHB 可抑制SW620 细胞的生长与增殖,还能提高结直肠癌细胞对化疗的敏感性.
关键词：结直肠癌；SW620 细胞；化疗敏感性
相关调查研究显示,结直肠癌新增病例和死亡人数分别为136,830 和50,310,各占癌症新发和死亡病例的8%,是男性和女性第三常见的癌症[1].结直肠癌患者无论是早期手术干预治疗或者晚期局部复发和远处转移的患者,化疗在该类患者的综合治疗中占据重要的地位和起到关键性作用.结直肠癌化疗方案经历了由氟尿嘧啶（5-FU）单药物治疗到新的化疗药物如奥沙利铂、伊立替康、卡培他滨的研发和上市以及分子靶向药物的出现,进一步提升了晚期结直肠癌的治疗效果.尽管如此,临床上仍有约一半的患者对化疗不敏感,且绝大部分起初有反应者最终也出现耐药,其原因在于不同肿瘤患者对化疗药物及其剂量的个体差异性.研究发现,遗传因素是决定药物疗效与毒性的主要因素之一[2].SDHB 是琥珀酸脱氢酶的一个亚基,SDHB 基因突变被视为肿瘤恶变和复发的高危因素,迄今为止,对SDH 基因在结直肠癌发生发展中的作用及机制研究国内外尚未见报道[3].因而,本研究运用高转移结肠癌SW620 细胞,探究SDHB 基因对5-FU 化学敏感性的影响.
1 材料与方法
1.1 材料
包含103 例病例的结直肠组织芯片,40 例配对的结直肠癌患者正常组织和肿瘤组织.人结肠癌 SW620 细胞株,细胞培养液,5-FU,miRNA 反转录试剂盒,SYBRGreen 试剂盒.
1.2 方法
1.2.1 细胞培养
结肠癌细胞LOVO 细胞由本实验室保存.常规复苏细胞,DMEM 培养基含10%小牛血清,37℃,5%CO2 环境培养.
1.2.2 稳定过表达、稳定沉默SDHB 结肠癌细胞系的构建前期研究中稳定过表达SDHB 结肠癌细胞系已构建成功.同样的以pMAGi1 载体采用上述慢病毒RNA 干扰技术构建稳定沉默SDHB 结肠癌细胞系.同时构建对照细胞.
1.2.3 MTT 法检测细胞增殖
取对数生长期的肿瘤细胞,接种于96 孔板,24 h 后用PBS或 5-FU 处理48 小时,加入MTT 孵育4h 后,再加入DMSO溶解形成的甲瓒晶体,用酶标仪测定570 nm 处的吸光度,并计算半数抑制浓度IC50.
1.3 统计学方法
运用统计学软件SPSS14.0 处理数据,用（均数&plun;标准差）表示计量资料.各组间计量资料间采用t 检验,P<0.05 表示差异显著.
2 结果
2.1 结肠癌细胞中SDHB mRNA 的表达差异
选取正常肠上皮细胞IEC-6 细胞作为对照组,SW620、HCT-116、LOVO 三株结肠癌细胞作为实验组,SDHB mRNA 的表达,如图1 所示,相较于对照组,SDHB mRNA 在各结肠癌细胞株中表达降低,差异具统计学意义（P等于0.001）,显示SDHB表达下调,尤其在LOVO 细胞中,差异最为明显.
2.2 术前化疗组、无化疗组中SDHB mRNA 在的表达差异
术前无化疗组和结直肠癌接受新辅助化疗组的SDHBmRNA 相对表达量分别为（0.61&plun;0.12）、（1.24&plun;0.16）,SDHBmRNA 表达水平相比无化疗组升高,差异有统计学意义（P等于0.002）.见图2.
2.3 化疗敏感组与化疗不敏感组中SDHB mRNA 的表达差异
SDHB mRNA 在化疗敏感组与不敏感组中表达相对值分别为（0.73&plun;0.13）、（0.49&plun;0.17）,化疗敏感组的SDHB mRNA表达水平高于不敏感组,差异有统计学意义（P等于0.02）.见图3.
结论
琥珀酸脱氢酶位于线粒体内膜,由SDHA、SDHB、SDHC与SDHD 四个亚基构成,是三羧酸循环和线粒体呼吸链的组成部分.SDH 是连接氧化磷酸化与电子传递的枢纽之一,为真榜细胞线牲体和多种原核细胞需氧和产能的呼吸链提供电子[4].研究认为SDH 为肿瘤抑制基因,其基因缺陷或表达异常与多种疾病的发生有关.SDHA 基因突变是Leigh 综合征的致病因素,同时SDHA 突变可导致副神经节瘤和胃肠道间质瘤的发生.而SDHB、SHDC 与SDHD 基因突变与副神经节瘤、嗜铬细胞瘤、肾癌、胃肠道间质瘤等肿瘤形成有关[5].SDHB 基因突变被视为肿瘤恶变和复发的高危因素.本课题组在前期研究中利用免疫组化技术检测了包含103 例病例的结直肠组织芯片中SDH 四个亚基的表达情况,结果发现SDHB 在结直肠癌组织中表达下调,过表达SDHB 可抑制SW620 细胞的生长与增殖,诱导细胞G1-S期阻滞,抑制裸鼠皮下移植瘤的形成,说明SDHB 基因在结直肠癌中发挥了抑癌作用.同时我们研究发现SDHB 在化疗不敏感组的表达水平低于敏感组.
综上,我们由前期研究结果推测SDHB 基因可能是结直肠癌化疗敏感性的预测靶基因.同时,我们的研究结果也显示,提高SDHB 基因的表达,可提高结直肠癌细胞对5-FU 化疗敏感性.
括而言之，本文是一篇适合不知如何写结直肠癌和敏感性和化疗方面的直肠癌专业大学硕士和本科毕业论文以及关于直肠癌论文开题报告范文和相关职称论文写作参考文献资料.
参考文献：
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