论文鲜牛奶中黄曲霉毒素M1检测的几种方法与控制措施，该文是关于检测类论文范文文献与黄曲霉毒素和鲜牛奶和控制措施方面论文怎么撰写.
摘 要：黄曲霉毒素Ml是鲜牛奶中最常见的一种污染物,其是黄曲霉毒素Bl的羟基化代谢产物,由于具有极高的耐热性,在常规烹调温度、高温灭菌或者巴氏杀菌条件下基本上不会被破坏.当动物或人食入该毒素,会危害人畜的肾脏和肝脏,可使人发生肝癌乃至死亡,因此必须重视检测牛奶中黄曲霉毒素Ml的含量.
关键词：鲜牛奶；黄曲霉毒素Ml；理化性质；检测方法；控制措施
中图分类号：S859. 84
文献标识码：B
文章编号：2095-9737(2018)12-0099-01
1 理化性质
黄曲霉毒素Ml(AFMl)是黄曲霉毒素Bl( AFBl)的羟基化衍生物,二呋喃环的氧杂萘邻酮作为其基本结构,分子式为C17 H12 07,相对分子量为328Da,熔点可高达299℃.AFM1是一种无色的长方形片状结晶,在365 nm紫外光照射下会呈现蓝紫色荧光,其在极性有机溶剂中容易溶解,但在非极性溶剂（如、石油醚和正己烷等）中无法溶解.该毒素具有极强的耐热性,只有在温度达到299℃是才会被破坏,因此牛奶中所含的AFM1经过常规烹调温度、超高温灭菌或者巴氏消毒后基本上不会被破坏.AFM1在部分化学试剂（如丙酮和次氯酸钠）作用下可完全被分解,因此常用于对污染过AFM1的材料或者容器进行解毒.
2 检测方法
免疫亲和柱法.原理是对检测样品先进行离心、脱脂、过滤处理,接着使用免疫亲和柱对滤液进行层析净化,将所含杂质除去后再来洗脱AFM1,之后通过荧光光度法对AFM1进行定量.样品预处理,即取50 mL液体牛奶和牛乳制品放人离心管中,添加氯化钠lg,溶解后以4000 r/min的速度进行10 min离心,上层为脂肪层,移取下层液体,经过玻璃纤维滤纸过滤后备用.柱净化,即先连接玻璃注射器和免疫亲和柱,准确吸取10 mL之前处理好的澄清滤液加入,接着连接空气压力泵,通过压力调节控制溶液以3～6 mL／min的速度流过免疫亲和柱,直到柱体有2～3 mL空气通过,之后加入10 mL 10%甲醇溶液对柱子进行2次清洗,流出液体全部弃去,再准确加入1 mL 80%甲醇溶液将已经免疫结合在柱上的AFM1洗脱,注意此时调整流速变为1～2 mL/min,将洗脱液收集在干净的玻璃试管中待检.荧光光度检测,先分别在激发波长360 nm和发射波长450 nm下对荧光光度计进行校准,绿色标定管为O,红色标定管为2．O,标定管为1．O&plun;0.2；接着在50 mLAFMl显阴性的样品中分别添加浓度为O、0.1μg/L、0.5μg/L、1μg/L的AFM1系列标准溶液,按照以上分析步骤进行分离纯化,在滤过的洗脱液再分别添加1 mL O．002%溴溶液和AFM1产生衍生物,放入荧光光度计中对荧光强度进行测定,由此绘制荧光强度和AFM1标准浓度的标准曲线；最后在待检样品洗脱液添加溴溶液衍生,对其荧光强度进行测定,根据标准曲线计算其中所含的AFM1.该检测方法的优点是净化效果好、灵敏度高、特异性高等,同时样品的前处理过程明显简化,不需要使用AFM1标准物质,使操作者在实验过程中可能受到的潜在危害大幅度降低.但整个操作比较复杂、繁琐,且容易出现浪费试剂和环境污染的情况,导致在一定程度上限制该方法的应用推广.
酶联免疫吸附法( ELISA).原理是固定于酶标板上的抗原和待检样品中所含的AFM1会特异性竞争抗体,并在固相载体表面构成抗原抗体复合物,将多余抗体成分洗去后添加酶标Ⅱ抗,与抗体反应,在酶的作用下促使显色剂显色,根据显色深浅程度对样品中所含的AFM1量进行判断.样品处理,即取50 mL待检牛奶样品,先进行降温处理,直到温度低于10℃,接着以3500 r／min的速度进行10 min离心,之后用吸管吸去上层脂肪层,取下层牛奶液进行检测.检测时,先将抗AFM1抗体包被于微孔板上,置于4℃条件下进行过夜处理,使其充分封闭；先在每孔中添加AFM1标准溶液或者样品处理液,接着添加AFM1酶结合物,置于37℃下经过30 min反应；洗板后在每孔中分别添加酶基质和显色剂,置于37℃下进行15 min显色,通过目视法或者仪器法进行测定；根据结果绘制标准曲线,并据此计算样品中所含的AFM1量.该检测方法的优点是特异性强、灵敏、快速、成本低等,仪器操作简单,使工作人员的劳动量明显减少,且待检样品无需经过特殊处理,可直接进行测定,在有大批样品进行检测筛选使用,且在现场检测时也可选用.
3控制措施
严格管理奶牛饲料.奶牛禁止饲喂发生霉变的饲料,因此在饲料生产、加工、运输、保存过程中要加强管理,避免收获饲料原料时经受雨淋,且经过适当晒干.合理控制青贮饲料质量,防止腐败,青贮饲料制作完成后要立即使用塑料薄膜覆盖,尽可能使其密封.调控精饲料（如玉米、豆粕等）的含水量和温度.确保饲料贮存条件良好,要求仓库干燥、阴凉,且适当通风,还要注意饲料四周要留有适当的储存空间.料仓要定期进行清洁,避免鼠咬和发生虫害等,尤其是仓中全部腐败变质的饲料必须清理干净.
加强检验检测.要求乳制品生产企业采取质量安全责任,并根据相关法律法规进行生鲜牛奶收购,且必须对其黄曲霉毒素Ml等各项指标进行检测.如果生鲜乳检测不合格,要依法采取无害化处理.
简而言之，本文是一篇关于对不知道怎么写黄曲霉毒素和鲜牛奶和控制措施论文范文课题研究的大学硕士、检测本科毕业论文检测论文开题报告范文和文献综述及职称论文的作为参考文献资料.
参考文献：
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