论文高钙菜茎总黄酮提取与抗氧化活性，该文是有关抗氧化论文范文文献与总黄酮和抗氧化和活性方面论文范本.
李艳红,彭 伟,侯斯晋
（绵阳市产品质量监督检验所,四川 绵阳 621000）
摘 要：首先采用乙醇提取高钙菜茎总黄酮,再分析其体外抗氧化活性.结果表明,高钙菜茎总黄酮得率为（1.64&plun;0.12）%,其总黄酮的 DPPH 自由基、超氧阴离子自由基和 ABTS 阳离子自由基清除率随着其浓度的增加不断增强,当浓度达到 40 μg/mL 时,茎总黄酮对 DPPH 的清除能力与 VC 清除能力相当,清除率达 100%；随着浓度的增加,高钙菜茎总黄酮对 ABTS 阳离子自由基清除能力明显高于 VC,浓度在 216.8 μg/mL 时清除率达74.16%.结果证明,高钙菜茎总黄酮具有较好的抗氧化活性.
关键词：高钙菜；茎；总黄酮；提取；抗氧化活性
中图分类号：TS201.1
高钙菜含有丰富的蛋白质、钙、磷、铁等矿物质元素,胡萝卜素、维生素 B 等营养素[1] ,以及生物碱、黄酮类化合物、β- 谷甾醇、没食子酸等功能因子[2-3] ,具有较好等抗氧化性、抗炎症、抗糖尿病、抗菌、抗病毒等生物活性[4] .目前,国内关于高钙菜的研究报道主要集中在高钙菜叶化学成分的分析、高钙菜总黄酮的提取工艺研究、高钙菜总黄酮的分离纯化以及抗氧化活性研究[5-7] ,而且原料大多来自华东、华中、华南（如安徽、湖北）等地.由于高钙菜除了嫩尖,还有大量的茎,尤其是在大量种植未及时采摘,由于高钙菜生长旺盛,会有大量茎产生,单纯丢弃会造成资源大量浪费.本文主要研究高钙菜茎总黄酮的提取与抗氧化活性,以期为合理利用该部分资源提供一定的实验数据.
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
高钙菜,2017 年 8 月采自西南科技大学蔬菜实验园,新鲜,无虫害.
试剂：芦丁对照品,南京替斯艾么中药研究所；1,1- 二 -2- 三硝基苯肼（DPPH·）、2,2- 联氮 - 二(3- 乙 基 - 苯 并 噻 唑 -6- 磺 酸 ) 二 铵 盐（ABTS）,SIGMA ALDRICH 公司；乙醇、等试剂均为分析纯.
1.2 仪器与设备
U-3900H 型紫外分光光度计,Hitachi 日立公司；Agilent1200 系列 LC-MS；RE-52A 旋转蒸发器,上海亚荣生化仪器厂；冷冻真空干燥仪,Thermo Electron Corporation.
1.3 试验方法
1.3.1 高钙菜茎总黄酮提取工艺
高钙菜→去叶留茎→清洗→沸水烫漂 30 s → 55 ℃烘干→粉碎→过 60 目筛,作为样品原料→总黄酮提取（料液比 1 ∶ 50,提取温度 85 ℃,提取时间 4 h,乙醇浓度 80%）→离心（4 500 r/min,15 min）→上清液备用.
1.3.2 总黄酮测定与得率计算
1.3.2.1 标准曲线绘制
以芦丁标准品为对照,采用 NaNO 2 -Al(NO 3 ) 3 法[8]测定总黄酮含量,以芦丁含量为横坐标,吸光值为纵坐绘制标准曲线,以浓度对吸光值进行回归,计算回归方程.根据标准曲线计算所得回归方程为 y等于1.000 6x+0.006,相关系数 R 2 等于0.999 8,x 为芦丁标准液浓度（mg/mL）,y 为吸光度.
1.3.2.2 样品总黄酮含量测定
取总黄酮待测液 1.0 mL 于 25 mL 具塞试管中,按照标准曲线方法加入待测试剂并测定吸光值,根据标准曲线计算总黄酮得率.
1.3.3 总黄酮抗氧化活性研究
1.3.3.1 DPPH 自由基清除活性
以无水乙醇作为参比,参考 Helal A 等[9]的方法,并略加修改. 向比色管中依次加入1 mL不同浓度样液、2 mL 0.1 mmol/L 的 DPPH 乙醇溶液,摇匀,室温黑处静置 30 min,在 517 nm 处测定不同时间各浓度样品溶液的吸光值 A i ；分别以等体积去离子水代替 DPPH 自由基和样品溶液,分别测定吸光值 A j 和 A c .按下式计算 DPPH·清除率（K）.
1.3.3.2 超氧阴离子自由基清除活性
参照邻苯三酚自氧化法[9] , 并略加修改. 在0～180 s内,每 30 s 在波长 319.5 nm 处测定一次吸光值.将测量值带入式（2）计算：
式（2）中：? A i 是加入样品溶液吸光值随时间的变化率；? A j 是不加显色剂溶液体系吸光值随时间的变化率；? A c 是不加样液溶液体系的吸光值随时间的变化率.
1.3.3.3 ABTS 阳离子自由基清除活性
参考 Helal A 等[9]的方法,并略加修改.在 25 mL 比色管中依次加入 40 μL 不同浓度试样及 4 mL ABTS 阳离子自由基（ABTS + ·）测定液,摇匀,准确反应 10 min,于734 nm处测定吸光值A i . 以去离子水代替ABTS + · 测定液,测定 A j ,再以去离子水代替样液,测定 A c .
1.3.4 数据统计与分析
每组实验重复 3 次,结果均以平均值 &plun; 标准差（X&plun;SD）表示,作图主要由 Excel2013 软件完成.
2 结果与分析
2.1 高钙菜总黄酮得率
在料液比 1 ∶ 50,提取温度 85℃,提取时间4 h,乙醇浓度 80% 条件下,高钙菜茎总黄酮得率（1.64&plun;0.12）%.
2.2 DPPH 自由基清除活性
高钙菜茎总黄酮、丁基羟基茴香醚（BHA）和VC 对 DPPH·的清能力结果,如图 1 所示.
由图 1 可知,高钙菜茎总黄酮和 VC 对 DPPH·的清除率均高于 BHA.在实验范围内,当抗氧化剂浓度在 38.4 μg/mL 以下时,茎总黄酮对 DPPH·的清除率几乎呈线性变化,当浓度继续增加时,DPPH·清除率增幅平缓接近于 100%.茎总黄酮、BHA、VC 清除DPPH· 的 IC 50 值 分 别 为 15.67 μg/mL、40.80 μg/mL、14.43 μg/mL,3 种试样清除 DPPH·能力大小排序为：VC ＞茎总黄酮＞ BHA.说明高钙菜茎总黄酮对DPPH·有良好的清除作用,与 VC 能力相当.
2.3 超氧阴离子自由基清除活性测定
高钙菜茎总黄酮、BHA 和 VC 对超氧阴离子自由基清能力结果,如图 2 所示.
由图 2 可知,随着试样浓度的增大,3 种抗氧化剂对超氧阴离子自由基的清除率逐渐升高,但 VC 对超氧阴离子自由基清除率快速增加至 100%,而茎总黄酮和 BHA 对超氧阴离子自由基清除率增幅较小,在221 μg/mL 时,茎总黄酮对超氧阴离子自由基清除率接近于 BHA；茎总黄酮、BHA、VC 清除超氧阴离子自由基的 IC 50 值分别为：117.01、144.91、55.65 μg/mL,超氧阴离子自由基清除能力大小依次为 VC ＞茎总黄酮＞ BHA.说明高钙菜茎总黄酮对超氧阴离子有较好的清除作用.
2.4 ABTS+ 自由基清除活性测定
高钙菜茎总黄酮、BHA 和 VC 对 ABTS + 自由基清能力结果,如图 3 所示.
由图 3 可知,随着试样浓度的增大,3 种抗氧化剂对 ABTS + 自由基的清除率呈线性增加,茎总黄酮清除ABTS + 自由基能力在各个浓度下均高于 VC 和 BHA,茎总黄酮、BHA、VC 清除 ABTS + 自由基的 IC 50 值分别 为：125.87 μg/mL、175.20 μg/mL、221.29 μg/mL,3 种试样对 ABTS + 自由基清除能力强弱顺序为：茎总黄酮＞ BHA ＞ VC.说明茎总黄酮对 ABTS + 自由基有良好的清除作用.
3 结语
高钙菜茎总黄酮得率为（1.64&plun;0.12）%.当高钙菜茎总黄酮浓度在 38.4 μg/mL 以上时,高钙菜茎总黄酮对 DPPH 自由基清除能力与 VC 相当,达 100%,明显高于 BHA；随着试样浓度的增大,VC 对超氧阴离子自由基清除率快速增加至 100%,而茎总黄酮和BHA 对超氧阴离子自由基清除率增幅较小,在浓度为221 μg/mL 时,茎总黄酮对超氧阴离子自由基清除率接近 BHA,达 74.29%；VC、BHA 和茎总黄酮随着试样浓度的增加对 ABTS + 自由基的清除率呈线性增加,茎总黄酮清除 ABTS + 自由基能力在各个浓度下均高于VC 和 BHA.
括而言之，此文为大学硕士与抗氧化本科抗氧化毕业论文开题报告范文和相关优秀学术职称论文参考文献资料，关于免费教你怎么写总黄酮和抗氧化和活性方面论文范文.
参考文献：
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